猪的小肠离体模型中蛋白质类氨基酸对CCK和GLP-1释放的影响

Maximiliano Müller，Elout Van Liefferinge，Marta Navarro，Elisabet Garcia-Puig，Alan Tilbrook，Robert van Barneveld，Eugeni Roura

单个氨基酸 (AA) 对猪肠道激素分泌和食欲调节的影响在很大程度上仍然未知。本研究目的在于确定20种蛋白质氨基酸对断奶后仔猪厌食激素：胆囊收缩素（CCK）和胰高血糖素样肽1（GLP-1）释放的影响。

试验屠宰6头25日龄的雄性小猪（长白 × 大白；体重6.94±0.29 kg），收集十二指肠、空肠和回肠的肠段。检测三个肠段的组织样本，确定哪一段与肠肽分析相关性更强。选用CCK 和 GLP-1 分泌和表达最高的长短，进行下一步试验。将肠道组织片段切开，清洗并剥离肌肉层，并收集圆形样品，在24孔板中培养1小时（37℃，5% v/v CO2）。培养液为不含葡萄糖的KRB缓冲液，处理分为对照组（无氨基酸添加）和20个氨基酸组（分别添加20种氨基酸中的一种，添加量为10mM）。培养完成后，收集组织和上清液，检测CCK和GLP-1分泌水平，及其基因表达量。

与近端空肠和回肠相比，断奶仔猪十二指肠中CKK分泌量和mRNA的表达量更高（P＜0.05），而回肠中GLP-1/胰高血糖素原水平显著高于十二指肠（P＜0.05）和空肠（仅GLP-1，P＜0.05）。基于以上结果，氨基酸对CCK和GLP-1分泌的影响仅分别在十二指肠和回肠中研究。无论哪种氨基酸都不能同时促进两种厌食激素的分泌。在必需氨基酸中，异亮氨酸、量氨酸、蛋氨酸和色氨酸显著促进回肠中GLP-1的分泌，而只有苯丙氨酸显著促进了十二指肠中CCK的分泌。在非必需氨基酸中，酰胺类氨基酸（谷氨酰胺和天冬氨酰）导致CCK的分泌，而谷氨酸和精氨酸促进了回肠中GLP-1的分泌。

基于动物消化和吸收机理，游离的氨基酸在小肠前段就被迅速吸收，其对肠道肽分泌的影响仅局限于小肠前段，因此，其主要影响CCK的分泌。与此不同的是，结合态的氨基酸只能通过反馈机制（如通过主要在回肠中分泌的GLP-1）刺激十二指肠中CCK的释放。

2022. J. Anim. Sci. 100(4): skac093

DOI：https://doi.org/10.1093/jas/skac093